Sugammadeks ve Neostigmin’in insan embriyonik böbrek hücreleri (HEK-293) üzerindeki sitotoksik etkilerinin karşılaştırılması
Evren Büyükfırat1, İsmail Koyuncu2, Mahmut Alp Karahan1, Orhan Binici1, Nuray Altay1, Adnan Kirmit2, Ataman Gönel2
1Harran Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Anesteziyoloji ve Reanimasyon A.D., Şanlıurfa
2Harran Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Tıbbi Biyokimya A.D., Şanlıurfa
GİRİŞ: Sugammadeks’in Neostigmin’e göre nöromusküler blokajı hızlıca geri döndürmesi ve bradikardi, sekresyonların artışı ve bronkospazm gibi istenmeyen yan etkilere sebep olmaması anestezi pratiğinde öncelikli olarak tercih edilmesine neden olmuştur. Çalışmamızda Sugammadeks ve Neostigmin’in insan embriyonik böbrek hücreleri üzerindeki sitotoksik etkilerini karşılaştırmayı amaçladık. GEREÇ-YÖNTEM: HEK-293 hücreleri stoktan açılarak küçük petri kaplarına ekildi ve petri kapları %80-90 oranında dolunca tripsinizasyon ile kaldırılıp 1x104 hücre/kuyucuk olacak şekilde 96 kuyucuklu steril plaklara ekildi. 24 saatlik inkübasyon süresi sonunda besi yerleri uzaklaştırılıp, her bir madde için 0, 5, 10, 25, 50, 100, 250 ve μg/ml dozları toplamda 200 μl besiyeri olacak şekilde hücrelere uygulandı. Maddelerin hücreler üzerinde sitotoksik etkilerini tespit etmek için MTT yöntemi kullanıldı. MTT testi canlı hücrelerdeki metabolik aktiviteyi, hücrelerin mitokondriyal dehidrogenaz enzimi aracılığı ile MTT’i parçalayarak, çözülebilir formazan tuzları oluşturması prensibine dayanarak yapılmaktadır. Hücrelere 24 saat madde uygulandıktan sonra her kuyucuğa 20 µl MTT reaktifi eklendi. %95 nem, % 5 CO2 İnkübatörde 4 saatlik inkübasyondan sonra pleyt okuyucuda (spektramax M5) 570 ve 630 nm'de ölçümler yapıldı. Bu ölçümler sonucunda elde edilecek absorbans değerlerinden background sinyali test sinyalinden çıkarılarak (OD570-OD630) grafikler oluşturulup, her maddenin IC50 değeri hesaplandı. BULGULAR: Çalışma sonucunda iki maddenin de HEK-293 hücreleri üzerinde yüksek dozlarda (IC50: 657,8- 18702,9 µg/ml ) sitotoksik etki gösterdiği tespit edildi. Neostigmin’in sitotoksik etkisinin Sugammadeks’e göre istatiksel olarak anlamlı şekilde (p<0.05) yüksek olduğu saptandı. SONUÇ: Nöromusküler blokajın geri döndürülmesinde Sugammadeks’in klinikteki üstünlüğü gerek Neostigmin’in istenmeyen yan etkilerinin görülmemesi gerekse hızlı etki gösterip postoperatif rezidüel bloğa bağlı komplikasyonların önlenmesi nedeniyle son dönemde anestezik yaklaşımda giderek daha çok tercih edilmesine neden olmuştur. Yapılan birçok klinik çalışmada farklı hasta sub gruplarında Sugammadeks’in daha güvenli olduğu gösterilmiştir. Sitotoksik etkilerin karşılaştırıldığı çalışmamız bu yönüyle ilk olmakla beraber özellikle renal yetmezlikli hastalarda anestezi yönetiminde yön gösterebileceği kanısındayız.
|